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信号通路
英文名称: Human Mitogen Activated Protein Kinase 14 (MAPK14) ELISA Kit
别名: MAPK14
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.74ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
丝裂原激活蛋白激酶14,也叫p38-α,是一种酶,由MAPK14基因编码。MAPK14是一个由360个氨基酸组成的41kDa蛋白。MAPK14编码的p38α有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)是p38 MAPK家族的原型成员。p38 MAPK也被称为压力激活丝氨酸/苏氨酸特异性激酶(SAPK)。除了MAPK14为p38α MAPK外,p38 MAPK家族还有三个成员,包括MAPK11、MAPK12和MAPK13,分别编码p38β MAPK、p38γ MAPK和p38δ MAPK异构体。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人丝裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人丝裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MAPK14, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人MAPK14 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.4-101.5
96.90
细胞裂解液(n=8)
96.1-108.3
105.40
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人MAPK14 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.8-96.0
91.70
89.2-110.1
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.2
94.90
105.8-115.9
108.60
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