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信号通路
英文名称: Human Filaggrin (FLG) ELISA Kit
别名: FLG
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 23.5-1500pg/mL
灵敏度: 11.8pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
丝聚合蛋白(FLG)是一种丝状相关蛋白,与上皮细胞的角蛋白纤维结合。在表 皮细胞的终端分化过程中,Filaggrin 单体串联成一个 350kDa 的大蛋白前 体,被称为 profilaggrin。在表皮中,这些结构存在于颗粒层细胞的角蛋白 颗粒中。Profilaggrin 在颗粒层和角质层之间的过渡期经历了蛋白质分解过 程,产生了单独的丝状蛋白单体,这可能是由钙依赖性的酶促成的。它的特 点是等电点特别高,这是因为其主要结构中组氨酸的含量相对较高。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人丝聚合蛋白(FLG)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人丝聚合蛋白(FLG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的FLG, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1500
750
375
187.5
93.7
46.8
23.5
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人FLG , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-102.8
97.10
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.1
105.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人FLG , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-96.5
92.50
90.5-110.5
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.2
94.60
105.6-115.1
108.20
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