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信号通路
英文名称: Human Collagen Type IV (Col Ⅳ) ELISA Kit
别名: Col Ⅳ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000ng/mL
灵敏度: 7.5ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)是一种主要存在于基底层的胶原蛋白。它在C端的C4结构域在翻译后处理中没有被去除，纤维头对头连接，而不是平行连接。另外，它在每三个残基中缺乏紧密的、胶原蛋白螺旋所必需的常规甘氨酸。这使得整体排列更加松散，有结节。这两个特点导致胶原蛋白形成片状，即基底层的形式。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Col Ⅳ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.56
1.71
1.19
0.79
0.46
0.3
0.23
0.08
校正OD 值
2.47
1.62
1.1
0.7
0.21
0.21
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人Col Ⅳ , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.0-101.0
96.70
血浆(n=8)
92.5-105.9
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.6
105.10
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人Col Ⅳ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.7
91.80
88.7-96.3
93.40
90.8-110.7
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.1
94.30
87.1-108.9
98.10
105.1-115.5
108.30
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