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信号通路
英文名称: Human Collagen Type II (COL2) ELISA Kit
别名: COL2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.62-40ng/mL
灵敏度: 0.24ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
II 型胶原蛋白(COL2)是关节软骨和透明软骨的基础,由同型胶原蛋白、II 型、 α1 链形成。它占软骨中所有蛋白质的 50%,占关节软骨胶原的 85-90%。II 型胶原蛋白形成了纤维素。这种纤维状的胶原蛋白网络使软骨能够夹住蛋白 多糖的聚集,并为组织提供抗拉强度
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Ⅱ型胶原(COL2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Ⅱ型胶原(COL2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的COL2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.97
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.88
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人COL2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
83.3-101.0
96.50
血浆(n=8)
92.6-105.8
102.70
组织匀浆(n=8)
95.9-106.9
103.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人COL2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.6
92.90
88.4-97.2
93.30
85.5-94.9
92.80
1:04
范围
平均回收率
86.7-103.5
94.20
86.5-102.6
92.50
85.2-103.4
94.10
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