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信号通路
英文名称: Human alpha-SYNo ELISA Kit
别名: α-SYNO
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.57ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
突触核蛋白为相对分子质量较小的蛋白质家族(127~140个氨基酸残基),包括α、β、γ 3种类型,其基因分别定位于染色体4q21、5q35和10q23,它们共享高度保守的N-末端结构域。α-突触核蛋白是一种在中枢神经系统突触前及核周表达的可溶性蛋白质,它与帕金森病的发病机制和相关功能障碍密切相关,是路易小体的主要成分。α-突触核蛋白的功能多样,可能参与到突触结构的维持、神经的可塑性、学习、记忆、发生、细胞粘附、磷酸化、细胞分化以及多巴胺的摄取调控等许多方面。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人α-突触核蛋白低聚物(α-SYNO)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人α-突触核蛋白低聚物(α-SYNO)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的α-SYNO, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.52
1.75
1.08
0.71
0.46
0.32
0.23
0.09
校正OD 值
2.43
1.66
0.99
0.62
0.23
0.23
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人α-SYNO , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.4-101.3
96.10
细胞裂解液(n=8)
92.8-104.1
101.30
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.4
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度人α-SYNO , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-96.3
92.50
88.2-97.1
93.20
90.7-110.0
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.5
94.70
87.3-108.9
98.20
105.3-115.1
108.10
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