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信号通路
英文名称: Human Alpha-klotho protein (α-klotho) ELISA Kit
别名: α-klotho
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.2-2000pg/mL
灵敏度: 15.9pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
α–klotho 蛋白(α-klotho)是一种跨膜蛋白，它对胰岛素的敏感性有一定的控 制作用，似乎参与了衰老。它通过增加 TRPV5 的表达和活性（减少肾脏对 磷酸盐的重吸收）和减少 TRPC6 的表达和活性（减少肠道对磷酸盐的吸收） 来改变细胞的钙平衡。它可以抑制氧化应激和炎症，从而减少内皮功能障碍 和动脉粥样硬化。血浆中的α-klotho 因有氧运动而增加，从而减少内皮功能 障碍。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人α–klotho蛋白(α-klotho)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人α–klotho蛋白(α-klotho)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的α-klotho, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.2
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人α-klotho , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.8-101.2
96.10
血浆(n=8)
92.1-105.3
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.2
105.10
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人α-klotho , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.1
91.10
88.1-96.8
93.30
90.0-110.7
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.8
94.40
87.7-108.3
98.70
105.7-115.3
108.60
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