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信号通路
英文名称: Human T-cell Immunoglobulin And Mucin Domain-containing Protein 3 (TIM-3) ELISA Kit
别名: TIM-3
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.12-5000pg/mL
灵敏度: 42pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
甲型肝炎病毒细胞受体 2(HAVCR2)也被称为 T 细胞免疫球蛋白粘蛋白分 子 3(TIM-3),是一种 HAVCR2(TIM-3)基因编码的蛋白质。它是 T 淋巴细 胞(CD4+和 CD8+T 细胞)、骨髓细胞(单核细胞、巨噬细胞、DC、肥大 细胞、NK 细胞)或不同类型肿瘤的各种细胞的一种跨膜蛋白。该受体是一 个免疫检查点,与其他抑制性受体包括细胞程序性死亡蛋白 1(PD-1)和淋 巴细胞激活基因 3 蛋白(LAG3)一起介导 CD8+T 细胞在增殖和分泌细胞因 子如 TNF-α、IFN-γ和 IL-2 方面的衰竭。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子3(TIM-3)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子3(TIM-3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的TIM-3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312.5
156.25
78.12
0
OD值
2.47
1.73
1.04
0.57
0.36
0.22
0.17
0.09
校正OD 值
2.38
1.64
0.95
0.48
0.13
0.13
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人TIM-3 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.3
96.70
血浆(n=8)
92.1-105.5
102.20
细胞培养上清(n=8)
97.1-108.7
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人TIM-3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.0
91.20
88.3-96.6
93.90
90.2-110.8
95.50
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.7
94.40
87.2-108.3
98.90
105.1-115.1
108.30
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