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信号通路
英文名称: Human Toll Like Receptor 4 (TLR4) ELISA Kit
别名: TLR4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Toll样受体4是一种蛋白质，也被指定为CD284（分化簇284），它的分子量约为95 kDa。TLR4是一种跨膜蛋白，是Toll样受体家族的成员，属于模式识别受体（PRR）家族。它的激活导致细胞内信号通路NF-κB和炎性细胞因子的产生，负责激活先天性免疫系统。表达TRL4的细胞是骨髓细胞（红细胞、粒细胞、巨噬细胞），而不是淋巴细胞（T细胞、B细胞、NK细胞）。大多数骨髓细胞也表达高水平的CD14，这有利于TLR4被LPS激活。它最著名的是识别脂多糖（LPS），一种存在于许多革兰氏阴性细菌（如奈瑟氏菌）和特定革兰氏阳性细菌中的成分。其配体还包括几种病毒蛋白、多糖和各种内源性蛋白。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人Toll样受体4(TLR4)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Toll样受体4(TLR4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的TLR4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.36
1.34
0.8
0.48
0.34
0.26
0.22
0.09
校正OD 值
2.27
1.25
0.71
0.39
0.17
0.17
0.13
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人TLR4 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
92.2-105.9
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.8
105.40
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人TLR4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.4
91.90
90.6-110.3
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.1
94.20
105.9-115.8
108.40
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