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信号通路
英文名称: Human S-Phase Kinase Associated Protein 1 (SKP1) ELISA Kit
别名: SKP1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.072ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
期激酶关联蛋白1,也被称为SKP1,是由SKP1基因编码的酶。该基因编码的蛋白质是SCF泛素连接酶蛋白质复合物的成员。它与F-box蛋白结合,例如细胞周期蛋白F,S期激酶相关蛋白2以及其他参与泛素依赖性蛋白水解的调节蛋白。编码的蛋白质还与蛋白质网络协作以控制β-连环蛋白水平,并影响β-连环蛋白依赖性TCF转录因子的活性水平。该基因的选择性剪接导致两个转录本变异。在7号染色体上已鉴定出相关的假基因。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人S-期激酶关联蛋白1(SKP1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人S-期激酶关联蛋白1(SKP1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的SKP1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.45
1.6
0.94
0.6
0.39
0.27
0.24
0.09
校正OD 值
2.36
1.51
0.85
0.51
0.18
0.18
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人SKP1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
83.6-101.5
96.20
细胞裂解液(n=8)
92.1-105.1
101.90
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人SKP1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.5
91.20
86.8-96.0
92.20
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.1
96.10
87.3-108.4
98.80
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