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信号通路
英文名称: Human Ras Homolog Gene Family, Member A (RHOA) ELISA Kit
别名: RHOA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Ras同源基因家族成员A,也称为转化蛋白RhoA,由RHOA基因编码,是Rho家族GTP酶中的一种小型GTP蛋白。尽管RhoA活性的作用尚不完全清楚,但它主要与细胞骨架调节有关,主要与肌动蛋白应力纤维形成和肌动蛋白收缩性有关。它作用于几个效应器。其中,对ROCK1和DIAPH1的描述最好。它和其他Rho GTP酶是一个更大的相关蛋白质家族的一部分,称为Ras超家族,这是一个参与细胞分裂调节和计时的蛋白质家族。它是最古老的Rho GTP酶之一,自15亿年以来,基因组中就存在同源物。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Ras同源基因家族成员A(RHOA)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Ras同源基因家族成员A(RHOA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的RHOA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.49
1.92
1.37
0.88
0.57
0.41
0.27
0.09
校正OD 值
2.4
1.83
1.28
0.79
0.32
0.32
0.18
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人RHOA , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.0-104.6
102.60
细胞裂解液(n=8)
96.4-108.5
103.30
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人RHOA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.9-96.4
93.20
90.1-110.7
96.30
1:04
范围
平均回收率
87.5-108.1
98.60
104.5-115.6
108.30
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