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信号通路
英文名称: Human Permeability Glycoprotein (P-gp) ELISA Kit
别名: P-gp
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.11ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
渗透性糖蛋白(P-gp或Pgp)也被称为多药耐药蛋白1(MDR1)或ATP结合盒亚家族B成员1(ABCB1)或分化簇243(CD243),是细胞膜的一种重要蛋白,由ABCB1基因编码,将许多外来物质从细胞中抽出。它也是一种170 kDa的跨膜糖蛋白,其中包括10-15 kDa的N端糖基化。分子的N端一半包含6个跨膜结构域,然后是一个带有ATP结合位点的大的细胞质结构域,然后是第二部分,有6个跨膜结构域和一个ATP结合位点,与多肽的前一半有超过65%的氨基酸相似性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人P糖蛋白;渗透性糖蛋白(P-gp)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人P糖蛋白;渗透性糖蛋白(P-gp)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的P-gp, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.28
1.85
1.23
0.8
0.53
0.39
0.3
0.08
校正OD 值
2.19
1.76
1.14
0.71
0.3
0.3
0.21
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人P-gp , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.8-101.8
96.40
细胞裂解液(n=8)
92.6-105.8
102.20
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人P-gp , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
85.5-95.8
91.80
88.4-96.5
93.40
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.1
94.50
87.2-108.6
98.90
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