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信号通路
英文名称: Human Podocan (PODN) ELISA Kit
别名: PODN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.151ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Podocan蛋白,也被称为PODN,由PODN基因编码。该基因编码的蛋白质是富含亮氨酸的小重复蛋白家族的成员,属于SLR蛋白家族的第五类,除了具有所有已鉴定的SLR蛋白中最大的LRR结构域外,它还具有独特的N端半胱氨酸富集模式,缺乏C端半胱氨酸残基,并且在基因组组织方面与其他SLR蛋白不同,它包含一个富含半胱氨酸的氨基酸末端CX3CXCX7C簇,后跟一个富含亮氨酸的重复结构域。研究表明,这种蛋白质可以抑制动脉损伤后的平滑肌细胞增殖和迁移。它参与肾功能,可能代表治疗糖尿病肾病的独特治疗靶点。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Podocan蛋白(PODN)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Podocan蛋白(PODN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PODN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.48
1.45
0.93
0.54
0.36
0.24
0.16
0.06
校正OD 值
2.39
1.36
0.84
0.45
0.15
0.15
0.07
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PODN , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
94.2-105.1
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.0
104.40
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人PODN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.7-96.0
93.30
90.3-110.4
96.40
1:04
范围
平均回收率
87.2-108.6
98.30
105.6-115.4
109.70
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