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信号通路
英文名称: Human Parkin protein(PP)ELISA Kit
别名: PP
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.073ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Parkin 蛋白(PP)是一种蛋白质，由 PARK2 基因编码。它是一种多蛋白 E3 泛 素连接酶复合物的组成部分，该复合物又是泛素-蛋白酶体系统的一部分，该 系统介导蛋白质的靶向降解。该基因的突变会导致一种家族性的帕金森病， 即常染色体隐性少年帕金森病（AR-JP）。此外，Parkin 被描述为丝裂吞噬 （线粒体的自噬）所必需。此外，Parkin 含有一个 C 端图案，可与 PDZ 结 构域结合。它已被证明与含有 PDZ 结构域的蛋白 CASK 和 PICK1 以 PDZ 依 赖的方式结合。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人Parkin蛋白(PP)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Parkin蛋白(PP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PP , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
92.1-104.0
101.20
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.0
105.70
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人PP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
89.2-96.6
94.90
90.0-110.3
96.30
1:04
范围
平均回收率
87.8-108.4
98.40
105.5-115.9
108.10
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