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信号通路
英文名称: Human N-terminal fragment of osteopontin (N-Osteopontin) ELISA Kit
别名: N-Osteopontin
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.14ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
骨桥蛋白(osteopontin, OPN)不仅是一种分泌型基质细胞细胞因子,还是一种循环促炎细胞因子,可诱导细胞粘附、迁移和炎症途径的激活。OPN 表达的慢性增加与主要不良心血管事件的风险增加有关。在炎症细胞浸润过程中,OPN 可在 168R/S169 位点被凝血酶裂解成两个片段,其中一个是 OPN 的 N 端片段(N-OPN),它暴露了一个隐蔽的整合素结合基序 162SVVYGLR168(小鼠中的 SLAYGLR),并与 α4β1 和 α9β1 整合素结合,从而发挥强大的促炎作用。OPN-N 通过增加白细胞介素 (IL)-17 和 IL-6 的产生在多发性硬化症中起关键作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人N末端骨桥蛋白(N-Osteopontin)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人N末端骨桥蛋白(N-Osteopontin)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的N-Osteopontin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人N-Osteopontin , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.5
96.90
血浆(n=8)
92.8-105.4
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.8
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人N-Osteopontin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.9
91.90
88.6-96.5
93.60
90.1-110.5
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.4
94.80
87.7-108.3
98.40
105.2-115.8
108.30
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