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信号通路
英文名称: Human Klotho ELISA Kit
别名: Klotho
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
克洛素(Klotho)为一种跨膜蛋白,会调控生物体对于胰岛素的敏感性。它具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性,可以水解β-葡萄糖醛酸,与人类老化有关。血浆中的循环克洛素会随年纪逐渐减少。β-克洛素会与FGF受体行程协同受体,可与FGF19、FGF20、FGF23等成纤维细胞生长因子(FGF)结合进行作用。克洛素的作用机转迄今未明,目前已知可以透过提升TRPV5和降低TRPC6的表达调控细胞的钙平衡。此外,克洛素也会增加内向整流离子通道ROMK的表达。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Klotho蛋白(Klotho)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Klotho蛋白(Klotho)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Klotho, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.15
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人Klotho , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.7
96.10
血浆(n=8)
92.1-105.5
102.10
组织匀浆(n=8)
96.0-108.8
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人Klotho , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.1
91.20
88.5-96.3
93.90
90.3-110.0
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.5
94.90
87.4-108.3
98.10
105.1-115.5
108.40
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