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信号通路
英文名称: Human KI-67 Protein (Ki67) ELISA Kit
别名: Ki67
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.152ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
KI67抗原(Ki67)是一种核蛋白,与细胞增殖有关。它是一种增殖细胞的相关抗原,其功能与有丝分裂密切相关,在细胞增殖中是不可缺少的。在临床上,它主要用于标记增殖周期中的细胞,该标记(+)率高这主要是由肿瘤生长越快,组织分化能力越差,而对ki67也越敏感。一般来说这样的肿瘤,预后都是较差的,通常很难完全治愈。晚期的肿瘤由于其分裂较快而细胞的分化较不完善,从而造成ki67的敏感性增高。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人KI67抗原(Ki67)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人KI67抗原(Ki67)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Ki67, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.66
2.04
1.51
1.04
0.65
0.39
0.22
0.09
校正OD 值
2.57
1.95
1.42
0.95
0.3
0.3
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人Ki67 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.3-101.8
96.80
细胞裂解液(n=8)
92.5-105.0
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.1
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度人Ki67 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.4
91.10
88.7-96.8
93.80
89.8-110.4
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.7
94.20
87.9-108.4
98.90
105.1-115.9
108.80
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