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信号通路
英文名称: Human Pro-Col I ELISA KIT
别名: Pro-Col Ⅰ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78-5000pg/mL
灵敏度: 38pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Ⅰ型胶原蛋白前体(Pro-Col Ⅰ)是Ⅰ型胶原蛋白合成过程中的关键中间产物,由COL1A1和COL1A2基因编码的α1链和α2链在细胞内合成后形成。其分子结构包含信号肽、前肽序列及三螺旋结构域,在分泌至细胞外基质后,经蛋白酶切除N端和C端前肽,暴露三螺旋区域,最终组装为成熟的Ⅰ型胶原蛋白纤维。Pro-Col Ⅰ在结缔组织中发挥核心作用,为皮肤、骨骼、肌腱等提供机械支撑与弹性。其异常表达或加工缺陷会导致成骨不全症、Ehlers-Danlos综合征等遗传性疾病,表现为骨骼脆弱、关节松弛、皮肤弹性异常等。此外,Pro-Col Ⅰ水平变化与皮肤老化、肿瘤进展等病理过程相关,是评估胶原蛋白代谢及疾病诊断的重要生物标志物。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Ⅰ型胶原蛋白前体(Pro-Col Ⅰ)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Ⅰ型胶原蛋白前体(Pro-Col Ⅰ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Pro-Col Ⅰ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312
156
78
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人Pro-Col Ⅰ , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.1
96.70
血浆(n=8)
92.1-106.5
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.4
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人Pro-Col Ⅰ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-94.8
91.20
88.2-96.0
93.40
90.1-110.7
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.4
94.10
87.7-108.4
98.30
105.7-114.4
107.70
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