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信号通路
英文名称: Human Type I collagen (ColⅠ) ELISA Kit
别名: ColⅠ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.07ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)是人体中含量最丰富的胶原蛋白,占比高达80%以上,是构成皮肤、骨骼、韧带、肌腱等结缔组织的主要成分。它具有两条α1链和一条α2链交错排列构成的三股螺旋结构,含有大量的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸。Ⅰ型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织形态学发生等方面具有重要作用,具有优异的生物活性、机械强度和结构稳定性,能够提供力学支撑、促进伤口愈合、维持组织形态以及促进细胞生长。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ColⅠ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人ColⅠ , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.4
96.20
血浆(n=8)
92.6-105.7
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.2
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人ColⅠ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.6
91.20
88.2-96.8
93.70
90.8-110.5
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.2
94.10
87.1-108.4
98.80
105.0-115.4
108.90
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