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信号通路
英文名称: Human Gremlin 1 (GREM1) ELISA Kit
别名: GREM1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 125-8,000pg/mL
灵敏度: 56.35pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、尿液、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Gremlin-1蛋白(GREM1)是一种高度保守的20.7kDa,184个氨基酸的糖蛋白,属于DAN家族,是一种半胱氨酸结分泌的蛋白。它因其在TGF beta信号传导途径中与骨形态发生蛋白(BMPs)的拮抗作用而闻名。它主要抑制肢体芽中的BMP2和BMP4,并作为自我调节反馈信号系统的一部分发挥作用,这对正常的肢体芽发育和指头形成至关重要。它在肢体芽中对BMPs的抑制使成纤维细胞生长因子(FGFs)4和8以及声猬(SHH)配体的转录上调,这是控制肢体芽发育进展的信号系统的一部分。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Gremlin-1蛋白(GREM1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Gremlin-1蛋白(GREM1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的GREM1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
8000
4000
2000
1000
500
250
125
0
OD值
2.1
1.4
0.88
0.58
0.37
0.27
0.2
0.07
校正OD 值
2.01
1.31
0.79
0.49
0.18
0.18
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人GREM1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
85.1-101.1
97.20
血浆(n=8)
92.7-105.7
102.10
组织匀浆(n=8)
96.4-108.6
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人GREM1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.3
91.40
88.6-97.8
94.80
90.1-110.6
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.0
94.90
87.1-108.3
98.20
105.6-115.7
108.30
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