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信号通路
英文名称: Human Tripartite motif-containing protein 21(TRIM21)ELISA kit
别名: TRIM21
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.151ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
E3 泛素蛋白连接酶 TRIM21(TRIM21)是一种由 TRIM21 基因编码的蛋白。 该基因的替代剪接转录变体已被描述,但只有一个基因的全长性质被确定。 它在大多数人体组织中都有表达。它是细胞内抗体介导的蛋白分解途径中的 一个细胞内抗体效应物。它能识别 Fc 结构域并与感染细胞的抗体标记的非包 膜病毒上的免疫球蛋白 G、免疫球蛋白 A 和免疫球蛋白 M 结合。通过自体 泛素化或辅助因子的泛素化,它负责将病毒引向蛋白酶体。它本身并不像病 毒外壳和结合的抗体那样在蛋白体中被降解。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人E3泛素蛋白连接酶TRIM21(TRIM21)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人E3泛素蛋白连接酶TRIM21(TRIM21)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的TRIM21, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人TRIM21 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-101.9
96.70
细胞裂解液(n=8)
96.5-108.3
105.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人TRIM21 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.7
90.60
90.8-110.3
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.0
94.50
105.1-115.1
108.90
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