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信号通路
英文名称: Human DNA Methyltransferase 3A (DNMT3A) ELISA Kit
别名: DNMT3A
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.03ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
甲基化是指从活性甲基化合物上将甲基催化转移到其他化合物的过程。可形成各种甲基化合物，或是对某些蛋白质或核酸等进行化学修饰形成甲基化产物。甲基化包括DNA甲基化和蛋白质甲基化。DNA甲基化主要是通过DNA甲基转移酶家族来催化完成的。DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)是重新甲基化酶，它使去甲基化的CpG位点重新甲基化，即参与DNA的从头甲基化。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的DNMT3A, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.15
0
OD值
2.28
1.82
1.23
0.8
0.53
0.36
0.23
0.08
校正OD 值
2.19
1.73
1.14
0.71
0.27
0.27
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人DNMT3A , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.4-101.5
96.30
细胞裂解液(n=8)
92.3-105.1
102.80
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人DNMT3A , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
83.2-95.8
91.60
88.3-96.8
93.70
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.8
94.10
88.0-108.6
98.70
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