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信号通路
英文名称: Human Dickkopf Related Protein 1 (DKK1) ELISA Kit
别名: DKK1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.34ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Dickkopf 1(DKK1)是一种由DKK1基因编码的蛋白质。该基因编码的蛋白质是Dickkopf家族的成员。它是一种具有两个富含半胱氨酸区域的分泌蛋白,通过抑制Wnt信号传导途径参与胚胎发育。DKK1编码的Dickkopf蛋白是Wnt/β-catenin信号通路的拮抗剂,通过隔离LRP6共同受体发挥作用,使其不能协助激活WNT信号通路。它还被证明通过减少β-catenin和增加OCT4的表达来拮抗Wnt/β-catenin通路。这种抑制作用在胚胎前部形态发生过程中对心脏、头部和前肢的发育起关键作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Dickkopf 1(DKK1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Dickkopf 1(DKK1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的DKK1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.35
1.55
1.03
0.64
0.45
0.33
0.24
0.09
校正OD 值
2.26
1.46
0.94
0.55
0.24
0.24
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人DKK1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
83.3-101.9
95.70
血浆(n=8)
92.1-105.8
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.1
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人DKK1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.8-95.6
92.70
87.3-96.4
93.30
90.7-110.4
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.4
94.30
87.4-108.3
98.60
105.3-115.2
108.10
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