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信号通路
英文名称: Human Crk Like Protein (CRKL) ELISA Kit
别名: CRKL
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.075ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Crk样蛋白,也被称为CRKL,是由CRKL基因编码的蛋白质。该基因编码含有SH2和SH3(src同源性)结构域的蛋白激酶,它已被证明可以激活RAS和JUN激酶信号通路,并以RAS依赖性方式转化成纤维细胞。它是BCR-ABL酪氨酸激酶的底物,在BCR-ABL的成纤维细胞转化中起作用。此外,它具有致癌潜力。它与Crk一起参与了DAB1下游的Reelin信令级联。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Crk样蛋白(CRKL)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Crk样蛋白(CRKL)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CRKL, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.49
1.62
0.96
0.53
0.33
0.24
0.2
0.08
校正OD 值
2.4
1.53
0.87
0.44
0.15
0.15
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人CRKL , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.2-101.7
95.10
细胞培养上清(n=8)
92.4-106.6
102.60
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人CRKL , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.2
90.10
86.2-96.6
93.50
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.1
94.20
87.5-108.0
98.80
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