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信号通路
英文名称: Human Cluster Of Differentiation 73 (CD73) ELISA Kit
别名: CD73
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.79ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
CD73 分子(CD73)又称 5′-核苷酸酶(5′-NT)或外生-5′-核苷酸酶,是一种表面酶,在多种细胞上表达。这种酶介导 ATP 和 ADP 的自分泌和旁分泌危险信号逐渐水解为抗炎的腺苷。由腺苷途径介导的免疫抑制对于维持免疫系统的平衡非常重要。T 调节细胞的免疫抑制功能也依赖于 CD73 的表达。Treg 一般会抑制免疫反应。它们影响T 细胞的增殖和功能。它也出现在过敏性CD4+ T 细胞上,从而维持对健康组织的自我耐受,以及在怀孕期间保护胎儿免受母亲免疫系统的影响。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人CD73分子(CD73)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人CD73分子(CD73)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CD73, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人CD73 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-102.3
97.80
血浆(n=8)
92.5-105.3
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.3
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人CD73 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.2
91.10
87.6-96.2
92.40
90.0-110.1
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.2
94.40
87.7-108.7
98.10
105.4-115.8
108.10
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