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信号通路
英文名称: Human Induced Myeloid Leukemia Cell Differentiation Protein Mcl-1 (MCL1)
别名: MCL1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.16ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Bcl2 相关髓细胞白血病序列 1,也被称为 MCL1,是由 MCL1 基因编码的蛋 白质。该基因编码的蛋白质属于 Bcl-2 家族。可变剪接发生在该基因座处, 并且已鉴定出编码不同同种型的两种转录变体。较长的基因产物(同种型 1) 通过抑制细胞凋亡来提高细胞存活率,而交替剪接的较短基因产物(同种型 2)促进细胞凋亡并诱导死亡。蛋白质 MCL1 的生物半衰期非常短,仅为 20-30 分钟。它的丢失比 Bcl-2 家族的任何其他抗凋亡成员的丢失具有更大 的影响。当胚胎只有大约 3.5 天大时,甚至在植入之前,该基因的缺失会导 致胚胎死亡。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Bcl2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Bcl2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MCL1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人MCL1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.9-101.3
96.30
细胞裂解液(n=8)
92.7-105.6
102.20
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人MCL1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.3
91.20
85.4-96.4
93.60
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.1
97.60
87.8-108.4
98.90
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