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信号通路
英文名称: Human Protein kinase B(PKB) ELISA Kit
别名: AKT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.14ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白激酶B（PKB），又称Akt，是一组三个丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶的总称，在多个细胞过程中发挥关键作用，如葡萄糖代谢、细胞凋亡、细胞增殖、转录和细胞迁移。三个不同的基因编码蛋白激酶B异构体的基因被称为AKT1、AKT2和AKT3，分别编码RAC α、β和γ丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。术语PKB和Akt可能是指所有三个基因的统称，但有时也用来单独指PKB alpha和Akt1。Akt异构体在各种人类肿瘤中过度表达，在基因组水平上，在胃腺癌（Akt1）、卵巢癌（Akt2）、胰腺癌（Akt2）和乳腺癌（Akt2）中被放大。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人AKT蛋白(AKT)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人AKT蛋白(AKT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的AKT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.38
1.7
1.12
0.72
0.44
0.32
0.23
0.08
校正OD 值
2.29
1.61
1.03
0.63
0.23
0.23
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人AKT , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.4-102.1
96.10
细胞裂解液(n=8)
92.1-105.1
102.40
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人AKT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.2-96.3
93.60
90.6-110.6
96.60
1:04
范围
平均回收率
87.3-108.2
99.10
105.2-115.4
108.40
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