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信号通路
英文名称: Human Oxoguanine Glycosylase 1 (OGG1) ELISA Kit
别名: hOGG1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.076ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(hOGG1)是一种DNA糖基化酶,由OGG1基因编码。它是负责切除8-氧代鸟嘌呤(8-oxoG)的主要酶,8-氧代鸟嘌呤是暴露于活性氧(ROS)而产生的诱变碱基副产物。OGG1是一种双功能的糖基化酶,因为它既能裂解诱变病变的糖苷键,又能导致DNA骨架上的断链。该基因C端区域的替代剪接将剪接变体分为两大类,1型和2型,取决于序列的最后一个外显子。1型替代剪接变体以第7外显子为终点,2型以第8外显子为终点。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(hOGG1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(hOGG1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的hOGG1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.36
1.79
1.28
0.86
0.63
0.38
0.26
0.08
校正OD 值
2.27
1.7
1.19
0.77
0.29
0.29
0.17
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人hOGG1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.7-101.8
96.20
细胞培养上清(n=8)
96.7-107.7
104.20
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人hOGG1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.2
91.40
90.0-110.5
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.4
94.20
105.8-114.9
107.90
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