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信号通路
英文名称: Human Heat shock protein beta-1 (HSPB1) ELISA Kit
别名: HSP-27
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.32ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
热休克蛋白27(Hsp27)也被称为热休克蛋白β-1(HSPB1),是一种由HSPB1基因编码的蛋白质。Hsp27是α-结晶蛋白、Hsp20等sHsp(小型热休克蛋白)组中的一种伴侣。sHsps的共同功能是伴侣活性、耐热性、抑制细胞凋亡、调节细胞发育和细胞分化。它们还参与信号转导。Hsp27在sHsps中相当独特,它的α-结晶域在二聚体界面上含有一个半胱氨酸残基,可以被氧化,形成二硫键,共价连接二聚体。N端由一个保守程度较低的区域组成,即所谓的WD/EPF结构域,然后是一个短的可变序列,该结构域的末端附近有一个相当保守的部位。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人热休克蛋白27(HSP-27)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人热休克蛋白27(HSP-27)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的HSP-27, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.36
1.79
1.28
0.86
0.63
0.38
0.26
0.08
校正OD 值
2.27
1.7
1.19
0.77
0.29
0.29
0.17
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人HSP-27 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.6
96.30
血浆(n=8)
92.0-105.2
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.4
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人HSP-27 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.3
90.80
88.5-96.4
93.80
90.1-110.1
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.9
94.70
87.9-108.4
98.90
105.3-115.1
108.40
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