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信号通路
英文名称: Human 14-3-3 protein gamma (YWHAG) ELISA Kit
别名: YWHAG
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.625-40ng/mL
灵敏度: 0.4ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
14-3-3 蛋白γ是由 YWHAG 基因编码的蛋白。该基因产物属于 14-3-3 蛋白家族,该家族通过与含磷脂的蛋白质结合来介导信号转导。这个高度保守的蛋白家族在植物和哺乳动物中都有。它在血管平滑肌细胞中被生长因子诱导, 在骨骼肌和心肌中也高度表达,表明该蛋白在肌肉组织中具有重要作用。与YWHAG 相关的疾病包括发育性和癫痫性脑病 56 和特殊学习障碍。它的相关途径包括β-肾上腺素信号传导和催乳素信号传导途径。与该基因相关的基因本体论(GO)注释包括 RNA 结合和蛋白激酶 C 结合。该基因的一个重要类似物是 YWHAH。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人14-3-3蛋白gamma(YWHAG)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人14-3-3蛋白gamma(YWHAG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的YWHAG, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人YWHAG , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.4
96.30
血浆(n=8)
92.0-105.2
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.3
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人YWHAG , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.7
91.10
88.3-96.5
93.70
90.7-110.3
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.6
94.40
87.7-108.2
98.10
105.6-115.4
108.70
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