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信号通路
英文名称: Mouse Epididymal Protein 4 (HE4) ELISA Kit
别名: HE4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 62.5-4000pg/mL
灵敏度: 29.98pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
附睾蛋白 4(HE4)是一种由 WFDC2 基因编码的蛋白质。它是一种卵巢癌的肿 瘤标志物,在 150pmol/L 的临界值时有 80%的敏感性。它是 WFDC 结构域 家族的成员。WFDC 结构域,即 WAP 签名图案,包含八个半胱氨酸,在蛋白质的核心部位形成四个二硫键,在许多家族成员中发挥蛋白酶抑制剂的作用。该基因在肺上皮细胞中表达,也被发现在一些卵巢癌中表达。编码的蛋 白是一种小型分泌蛋白。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠附睾蛋白4 (HE4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠附睾蛋白4 (HE4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的HE4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
4000
2000
1000
500
250
125
62.5
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠HE4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.4
96.50
血浆(n=8)
92.2-105.0
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.9
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠HE4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.6
91.70
88.6-96.4
93.20
90.1-110.1
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.4-104.5
95.10
87.1-108.4
98.90
105.1-115.2
108.70
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