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信号通路
英文名称: Mouse Hepcidin (Hepc) ELISA Kit
别名: Hepcidin
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 125-8000pg/mL
灵敏度: 65.9pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
铁调素是一种蛋白质,由HAMP基因编码。它是哺乳动物体内铁进入血液循环的一个关键调节因子。在血色素水平异常高的情况下,如炎症,由于铁被截留在巨噬细胞和肝细胞内以及肠道铁吸收减少,血清铁会下降。这通常会导致贫血,因为可用于发育红细胞的血清铁量不足。当血色素水平异常低下时,如在血色素沉着病中,由于铁蛋白介导的铁外流增加,肠道铁吸收增加,会出现铁过载。铁调素以前激素(84个氨基酸)、前激素(60个氨基酸)和激素(25个氨基酸)的形式存在。在尿液中还存在20个和22个氨基酸的血色素代谢物。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠铁调素(Hepcidin)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠铁调素(Hepcidin)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的Hepcidin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
8000
4000
2000
1000
500
250
125
0
OD值
2.32
1.5
0.87
0.52
0.35
0.24
0.18
0.08
校正OD 值
2.23
1.41
0.78
0.43
0.15
0.15
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠Hepcidin , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.0
96.70
血浆(n=8)
92.9-105.7
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.0
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠Hepcidin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.2
91.60
88.7-96.0
93.20
90.2-110.6
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.5
94.30
87.7-108.1
98.70
105.6-115.4
108.20
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