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信号通路
英文名称: Mouse Calcium Sensing Receptor (CASR) ELISA Kit
别名: CASR
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
钙敏感受体(CaSR)是一种C类G蛋白偶联受体,可感应细胞外的钙离子水平。它主要在甲状旁腺、肾脏的肾小管和大脑中表达。在甲状旁腺中,它通过调节甲状旁腺激素(PTH)的释放来控制钙的平衡。在血浆钙浓度升高和钙受体激活的情况下,PTH的释放被抑制。细胞外侧的钙结合增加使受体发生构象变化,在细胞内侧启动磷脂酶C途径,大概是通过Gqα型的G蛋白,最终增加细胞内的钙浓度,抑制甲状旁腺激素的囊泡融合和外渗。它还能抑制cAMP依赖性途径。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠钙敏感受体(CASR)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠钙敏感受体(CASR)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的CASR, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.1
1.86
1.36
0.94
0.57
0.36
0.25
0.09
校正OD 值
2.01
1.77
1.27
0.85
0.27
0.27
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠CASR , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.2-101.6
96.10
细胞裂解液(n=8)
92.3-105.5
102.10
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠CASR , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.1
91.50
88.6-96.4
93.10
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.2
94.60
87.4-108.6
98.30
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