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信号通路
英文名称: Mouse Transcription factor T-bet (t-bet) ELISA Kit
别名: t-bet
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.075ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 细胞裂解液
隐藏域元素占位
详细信息
简介
T-box转录因子TBX21，也称为T-bet，是由TBX21基因编码的蛋白质。该基因是一个在系统发育上保守的基因家族的成员，该家族有一个共同的DNA结合域，即T-box。对小鼠的研究表明，Tbx21蛋白是一个Th1细胞特异性的转录因子，控制着标志性Th1细胞因子--干扰素-γ（IFNG）的表达。T-bet 的功能在 T 辅助细胞（Th 细胞）中最为人所知。在幼稚 Th 细胞中，该基因不组成型表达，但可以通过 2 个独立的信号通路 IFNg-STAT1 和 IL-12-STAT4 通路诱导。两者都需要合作才能达到稳定的 Th1 表型。Th1 表型也通过抑制其他 Th 细胞表型 （Th2 和 Th17） 的调节因子来稳定。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠转录因子t-bet(t-bet)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠转录因子t-bet(t-bet)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的t-bet, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.11
1.26
0.8
0.5
0.33
0.24
0.19
0.08
校正OD 值
2.02
1.17
0.71
0.41
0.15
0.15
0.1
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠t-bet , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
细胞裂解液(n=8)
96.7-108.2
105.90
(n=8)
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠细胞裂解液中加入高浓度小鼠t-bet , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
90.9-110.0
96.10
1:04
范围
平均回收率
105.8-115.1
108.60
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