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信号通路
英文名称: Mouse Glutathione Peroxidase 4 (GPX4) ELISA Kit
别名: GPX4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.2-2000pg/mL
灵敏度: 15.2pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
谷胱甘肽过氧化物酶4,也被称为GPX4,由GPX4基因编码的酶。GPX4是一种磷脂过氧化物酶,可保护细胞免受膜脂质过氧化的影响。抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)属于谷胱甘肽过氧化物酶家族,该家族由8种已知的哺乳动物同功酶(GPX1-8)组成。GPX4催化还原过氧化氢、有机氢过氧化物和脂质过氧化物,以牺牲还原型谷胱甘肽为代价,并在保护细胞免受氧化压力方面发挥作用。谷胱甘肽的氧化形式(谷胱甘肽二硫化物),在GPX4还原氢过氧化物的过程中产生,被谷胱甘肽还原酶和NADPH/H+回收。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的GPX4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.2
0
OD值
2.32
1.89
1.4
0.97
0.58
0.37
0.22
0.07
校正OD 值
2.23
1.8
1.31
0.88
0.28
0.28
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠GPX4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.0-101.9
96.90
血浆(n=8)
92.2-105.4
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.8
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠GPX4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.7
91.20
88.9-96.8
93.20
90.5-110.8
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.5
95.10
87.8-108.4
98.50
105.1-115.7
108.10
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