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信号通路
英文名称: Mouse Glutathione transferase (GST) ELISA Kit
别名: GST
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.072ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
谷胱甘肽转移酶(GST)以前被称为配体,是真核和原核第二阶段代谢同工酶家族,因其能够催化谷胱甘肽(GSH)的还原形式与异生物底物共轭以达到解毒的目的而最为著名。GST家族由三个超家族组成:细胞膜、线粒体和微粒体--也称为MAPEG--蛋白。GSTs在一些哺乳动物器官中可占细胞膜蛋白的10%。GSTs通过巯基催化GSH与多种底物上的亲电中心共轭,以使化合物更易溶于水。GSTs还可以结合毒素并作为运输蛋白发挥作用,这就产生了GSTs的早期术语--利甘定。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠谷胱甘肽转移酶(GST)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠谷胱甘肽转移酶(GST)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的GST, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.47
1.4
0.77
0.46
0.32
0.22
0.2
0.08
校正OD 值
2.38
1.31
0.68
0.37
0.13
0.13
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠GST , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.0-101.6
96.30
血浆(n=8)
92.9-105.6
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.6-107.8
104.90
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠GST , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.3
91.20
89.5-96.5
94.60
90.6-110.2
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.5
94.60
87.7-108.5
98.40
105.0-115.9
108.50
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