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信号通路
英文名称: Mouse Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (INOS) ELISA Kit
别名: iNOS
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.8-500IU/mL
灵敏度: 3.8IU/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
诱导型NO合酶(iNOS)是由氨基酸l-arginine生成一氧化氮(NO)的三种关键酶之一。INOS衍生的NO在许多生理(如血压调节、伤口修复和宿主防御机制)和病理生理(炎症、感染、肿瘤性疾病、肝硬化、糖尿病)条件下发挥着重要作用。然而,INOS在肿瘤发展过程中的作用是非常复杂的,如蜕变、血管生成和转移,是由INOS调节的。另一方面,来自巨噬细胞的NO对肿瘤细胞有潜在的细胞毒性/细胞抑制作用。因此,对INOS活动的治疗干预具有相当大的意义,特别是在肿瘤中,转移活动、宿主防御机制和分化水平与INOS的表达相关。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠诱导型NO合酶(iNOS)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠诱导型NO合酶(iNOS)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的iNOS, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度IU/mL
500
250
125
62.5
31.2
15.6
7.8
0
OD值
2.67
2.05
1.48
0.97
0.67
0.42
0.27
0.09
校正OD 值
2.58
1.96
1.39
0.88
0.33
0.33
0.18
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠iNOS , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.2-103.3
98.30
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.7
105.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠iNOS , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.2
91.70
90.2-110.2
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.0-105.6
95.60
104.0-115.4
108.50
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