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信号通路
英文名称: Mouse Complement Component 5a (C5a) ELISA Kit
别名: C5a
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 6.9pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
补体片断5a（C5a）是蛋白酶C5-转化酶将补体成分C5裂解为C5a和C5b片段后释放的蛋白质片段。C5a作为一种高度炎症性的肽，鼓励补体激活，形成MAC，吸引先天性免疫细胞，并在过敏反应中释放组胺。C5的起源是在肝细胞中，但它的合成也可以在巨噬细胞中发现，在巨噬细胞中可能引起C5a的局部增加。C5a是一种趋化剂和抗过敏剂，它在先天性免疫中至关重要，但也与适应性免疫有关。C5a的产生增加与一些炎症性疾病有关。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠补体片断5a(C5a)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠补体片断5a(C5a)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的C5a, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2
1.64
1.22
0.84
0.5
0.34
0.25
0.09
校正OD 值
1.91
1.55
1.13
0.75
0.25
0.25
0.16
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠C5a , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.6-101.9
96.20
血浆(n=8)
92.2-105.7
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.8
105.70
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠C5a , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.9
91.70
88.5-96.9
93.90
90.5-110.1
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.0
94.30
87.6-108.5
98.90
105.0-115.3
108.60
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