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信号通路
英文名称: Mouse Complement Component 9 (C9) ELISA Kit
别名: C9
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.074ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
补体成分C9(C9)是一种参与补体系统的MACPF蛋白,是先天免疫系统的一部分。一旦被激活,大约12-18个C9分子聚合在目标细胞膜上形成孔隙,导致裂解和细胞死亡。它是补体膜攻击复合物(MAC)的一个成员,它还包括补体成分C5b、C6、C7和C8。MAC的形成通过三种不同的途径:经典途径、替代途径和凝集素途径。C9形成的孔隙是感染期间杀死细菌细胞的重要途径,目标细胞往往被多个MAC覆盖。缺少C9的临床影响是感染革兰氏阴性细菌脑膜炎杆菌。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠补体成分C9(C9)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠补体成分C9(C9)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的C9, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.97
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.88
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠C9 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.9
96.80
血浆(n=8)
92.7-105.1
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.2
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠C9 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.4
91.10
88.6-96.5
93.40
90.2-110.1
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.7-104.6
95.70
87.7-108.9
98.60
105.7-115.8
108.30
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