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信号通路
英文名称: Mouse Heme Oxygenase 1 (HO-1) ELISA Kit
别名: HO-1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
血红素加氧酶-1(HO1)是热休克蛋白(HSP)家族的成员,被确定为HSP32。它是一种32kDa的酶,含有288个氨基酸残基,由HMOX1基因编码。它不是血蛋白,因为它不包含任何血红素修复基团。HO1的活性依赖于NADPH-焦色素P450还原酶。它是一种存在于全身的应激性异构体,在脾脏、肝脏和肾脏中浓度最高,在细胞水平上主要位于内质网中,它也可以作为一种伴侣蛋白,参与蛋白-蛋白的相互作用,分泌到细胞外空间,并参与其催化活性以外的其他细胞功能。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠血红素氧合酶1(HO-1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠血红素氧合酶1(HO-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的HO-1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.51
1.96
1.24
0.72
0.46
0.3
0.22
0.09
校正OD 值
2.42
1.87
1.15
0.63
0.21
0.21
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠HO-1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.6
96.90
血浆(n=8)
92.1-105.7
102.70
细胞裂解液(n=8)
96.2-108.1
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠HO-1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.1-96.5
91.90
88.1-96.9
93.30
90.8-110.5
95.30
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.2
94.50
87.8-108.5
98.30
105.8-115.5
108.20
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