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信号通路
英文名称: Mouse Angiostatin (ANG) ELISA Kit
别名: ANG
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.46ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
血管抑制素(ANG),是天然存在的蛋白质。它是内源性血管生成抑制剂。它是一种较大蛋白质纤溶酶(本身是纤溶酶原的片段)的38 kDa片段,包含三到五个连续的kringle模块。每个模块包含两个小的β片和三个二硫键。它有四种不同的结构变异,在kringle结构域的组合中有所不同:K1-3,K1-4,K1-5,K1-4,具有K-5片段。每个kringle结构域对细胞因子的贡献不同的抑制元素。研究表明,K1-3的关键是它的抑制性质。它可结合许多蛋白质,特别是血管分子素和内皮细胞表面ATP合酶,但也结合整联蛋白,膜联素II,C-met受体,NG2蛋白聚糖,组织型纤溶酶原激活剂,硫酸软骨素蛋白聚糖和CD26。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠血管抑素(ANG)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠血管抑素(ANG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的ANG, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.29
1.29
0.71
0.43
0.29
0.2
0.18
0.07
校正OD 值
2.2
1.2
0.62
0.34
0.11
0.11
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠ANG , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-103.8
96.60
血浆(n=8)
92.5-105.7
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.0
106.40
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠ANG , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.6
91.40
88.9-96.6
93.80
90.6-110.5
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.4
94.40
87.3-108.8
98.40
105.0-115.1
108.50
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