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信号通路
英文名称: Mouse Vascular pseudohemophilic factor antigen(VWF Ag) ELISA Kit
别名: VWF Ag
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.8-500ng/mL
灵敏度: 3.7ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
血管假血友病因子(VWF)是一种由血管内皮细胞及巨核细胞合成和分泌的大分子糖蛋白,主要由第12号染色体短臂编码。作为血浆中的关键成分,VWF在止血过程中发挥双重作用:一方面通过与血小板膜糖蛋白GPⅠb-Ⅸ复合物及内皮下胶原结合,介导血小板在血管损伤部位的黏附;另一方面作为凝血因子Ⅷ的载体,保护其稳定性并促进凝血反应。VWF水平异常与多种疾病相关。缺乏VWF会导致血管性血友病,表现为出血倾向;而其水平升高则与血栓性疾病、心肌梗死、糖尿病及妊娠期高血压等病理状态相关。临床常通过检测VWF抗原(VWF Ag)含量评估其功能状态,辅助诊断相关疾病并指导治疗。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠血管假血友病因子抗原(VWF Ag)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠血管假血友病因子抗原(VWF Ag)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的VWF Ag, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
500
250
125
62.5
31.2
15.6
7.8
0
OD值
2.03
1.21
0.69
0.41
0.29
0.23
0.19
0.09
校正OD 值
1.94
1.12
0.6
0.32
0.14
0.14
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠VWF Ag , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-100.3
95.10
血浆(n=8)
92.4-106.5
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.4
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠VWF Ag , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.9
91.90
88.7-95.9
93.10
90.3-110.0
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.0
94.10
87.8-108.9
98.60
105.8-114.4
107.30
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