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信号通路
英文名称: Mouse Thrombopoietin (TPO) ELISA Kit
别名: TPO
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 3.28pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
血小板生成素(TPO)是促进血小板生成最重要的细胞因子。TPO通过结合细胞表面的TPO受体(TPO-R),发挥促进血小板生成作用。TPO-R激动剂(TPO-RA)通过结合并激活TPO-R,有效地刺激血小板生成。TPO是机体内促进血小板生成最关键的细胞因子。血液循环中的TPO主要由肝细胞合成,少部分由骨髓基质细胞和肾细胞合成。TPO由2个不同的结构域构成,包括第1~153位氨基酸残基组成的促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)样结构域和第154~332位氨基酸残基组成的富含糖基的结构域。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠血小板生成素(TPO)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠血小板生成素(TPO)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的TPO, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.44
1.87
1.29
0.83
0.58
0.38
0.27
0.08
校正OD 值
2.35
1.78
1.2
0.74
0.29
0.29
0.18
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠TPO , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.0-101.8
96.60
血浆(n=8)
92.8-105.1
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.0
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠TPO , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.6
91.90
88.6-96.0
93.20
90.7-110.6
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.5
94.50
87.4-108.3
98.70
105.3-115.9
108.60
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