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信号通路
英文名称: Mouse Protein kinase A(PKA)
别名: PKA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.072ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白激酶 A(PKA)是一个酶家族,其活性取决于细胞中环状 AMP(cAMP) 的水平。它也被称为 cAMP 依赖的蛋白激酶(EC 2.7.11.11)。PKA 在细胞 中具有多种功能,包括调节糖原、糖和脂质的代谢。它是研究最广泛的蛋白 激酶之一,部分原因是它的独特性;在构成激酶组的 540 个不同的蛋白激酶 基因中,只有一个其他的蛋白激酶,即酪蛋白激酶 2,以生理性四元复合物 存在,即由四个亚单位组成。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠蛋白激酶A(PKA)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠蛋白激酶A(PKA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的PKA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.01
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠PKA , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.1
96.20
血浆(n=8)
92.8-105.7
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.7-107.8
104.10
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠PKA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.5
91.10
88.1-96.0
93.30
90.9-110.1
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.2
94.40
87.1-108.0
98.80
105.9-115.7
108.50
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