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信号通路
英文名称: Mouse Fatty Acid Synthase (FASN) ELISA Kit
别名: FASN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.077ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
脂肪酸合酶,也被称为 FASN,是由 FASN 基因编码的酶。脂肪酸合酶是一种催化脂肪酸合成的多酶蛋白。它不是单一的酶,而是由两个相同的 272kDa多功能多肽组成的完整酶系统,其中底物从一个功能域传递到下一个功能域。其主要功能是在 NADPH 存在下催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 合成棕榈酸酯(C16:0,一种长链饱和脂肪酸)。脂肪酸由乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A通过一系列脱羧克莱森缩合反应合成。在每一轮延伸之后,通过酮还原酶(KR)、脱水酶(DH)和烯酰还原酶(ER)的顺序作用,β酮基被还原为完全饱和的碳链。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠脂肪酸合酶(FASN)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠脂肪酸合酶(FASN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的FASN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠FASN , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.7-105.1
101.70
细胞裂解液(n=8)
99.5-108.5
105.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠FASN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.6-96.1
93.50
90.8-110.4
96.50
1:04
范围
平均回收率
87.1-108.0
98.70
105.6-115.8
108.70
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