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信号通路
英文名称: Mouse Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor (GDNF) ELISA Kit
别名: GDNF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 16.37pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、脑脊液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)是一种蛋白质,由GDNF基因编码。它于1991年被发现,是GDNF配体家族(GFL)的第一个成员。GDNF是一种小蛋白,能有效地促进多种类型的神经元的生存。它还负责将精原细胞确定为初级精母细胞,即它被RET接收,并通过与SCF形成梯度,将精原细胞分成两个细胞。GDNF的结构与TGFβ2相似,它有两个指状结构,与GFRα1受体相互作用。在原GDNF的分泌过程中发生的N-连接糖基化发生在其中一个指状结构的顶端。成熟的GDNF的C端在与Ret和GFRα1受体的结合中起着重要作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的GDNF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.28
1.63
1.04
0.69
0.45
0.3
0.22
0.09
校正OD 值
2.19
1.54
0.95
0.6
0.21
0.21
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠GDNF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-103.5
98.10
血浆(n=8)
92.5-106.6
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.6
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠GDNF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.7
91.10
87.2-96.6
92.60
90.4-110.1
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.8
94.90
87.8-108.1
98.20
105.5-115.4
108.20
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