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信号通路
英文名称: Mouse Caspase 3 (CASP3) ELISA Kit
别名: CASP3
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胱天蛋白酶3(Casp-3，Caspase-3)是一种与caspase-8和caspase-9相互作用的caspase蛋白。它是由CASP3基因编码的。CASP3的同源物已在许多有完整基因组数据的哺乳动物中被发现。CASP3蛋白是半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶（caspase）家族的成员。caspases的顺序激活在细胞凋亡的执行阶段起着核心作用。它以非活性原酶的形式存在，经过保守的天冬氨酸残基的蛋白水解处理，产生两个亚单位，大的和小的，二聚体形成活性酶。该蛋白裂解并激活了Caspases 6和7；而该蛋白本身被Caspases 8、9和10加工并激活。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠胱天蛋白酶3(CASP3)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠胱天蛋白酶3(CASP3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的CASP3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.44
1.87
1.29
0.83
0.58
0.38
0.27
0.08
校正OD 值
2.35
1.78
1.2
0.74
0.29
0.29
0.18
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠CASP3 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.3
105.10
(n=8)
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠细胞培养上清中加入高浓度小鼠CASP3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
90.2-110.9
95.80
1:04
范围
平均回收率
105.8-115.9
108.10
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