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信号通路
英文名称: Mouse Caspase 1 (Casp1) ELISA Kit
别名: Casp1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.2-2000pg/mL
灵敏度: 15.2pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胱天蛋白酶 1(Casp1)是一种进化保守的酶,它能将其他蛋白质,如炎症细胞因子白细胞介素 1β和白细胞介素 18 的前体以及热病诱导剂 Gasdermin D, 蛋白分解为活性成熟肽。一旦通过形成炎症体复合物被激活,它就会通过裂解启动两种炎症细胞因子,白细胞介素 1β(IL-1β)和白细胞介素 18(IL-18),以及通过裂解 Gasdermin D 启动火毒症(一种程序性的细胞死亡途径), 被 Caspase-1 激活的两种炎症细胞因子会从细胞中排出,进一步诱发邻近细胞的炎症反应。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠胱天蛋白酶1(Casp1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠胱天蛋白酶1(Casp1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的Casp1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.2
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠Casp1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-101.6
96.70
细胞裂解液(n=8)
92.8-105.1
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.0
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度小鼠Casp1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.7
91.60
88.1-96.3
93.70
90.2-110.2
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.9
94.20
87.5-108.3
98.70
105.2-115.0
108.40
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