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信号通路
英文名称: Mouse Cholesterol 7 Alpha Hydroxylase (CYP7A1) ELISA Kit
别名: CYP7A1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.18ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胆固醇 7α羟化酶(CYP7A1)又称胆固醇 7-α-单氧酶或细胞色素 P450 家族 成员 7A1,是一种酶,由 CYP7A1 基因编码,在胆固醇代谢中具有重要作用。 它是一种细胞色素 P450 酶,属于氧化还原酶类,将胆固醇转化为 7-α-羟基 胆固醇,这是胆汁酸合成的第一步和限制性步骤
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的CYP7A1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.97
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.88
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠CYP7A1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.0-101.7
96.30
血浆(n=8)
92.1-105.3
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.1
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠CYP7A1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.2
91.90
88.6-96.5
93.70
90.0-110.2
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.4
94.10
87.7-108.0
98.10
105.1-115.5
108.40
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