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信号通路
英文名称: Mouse Tumor necrosis factor receptor type 1-associated DEATH domain protein (TRADD) ELISA Kit
别名: TRADD
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.08ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肿瘤坏死因子受体 1 型相关死亡域蛋白是一种蛋白质,由 TRADD 基因编码。TRADD 是一种适应性蛋白。该基因编码的蛋白是一种含有死亡域的适应分子,与 TNFRSF1A/TNFR1 相互作用,并介导程序性细胞死亡信号和 NF-κB 的激活。该蛋白与适应蛋白 TRAF2 结合,减少 TRAF2 对凋亡抑制蛋白(IAPs) 的招募,从而抑制 TRAF2 介导的凋亡。该蛋白还能与受体 TNFRSF6/FAS 和适应蛋白 FADD/MORT1 相互作用,并参与 Fas 诱导的细胞死亡途径。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠肿瘤坏死因子受体相关死亡域蛋白(TRADD)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠肿瘤坏死因子受体相关死亡域蛋白(TRADD)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的TRADD, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠TRADD , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.9
96.20
血浆(n=8)
92.8-105.9
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.4
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠TRADD , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.2
91.10
88.9-96.1
93.40
90.2-110.5
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.8
94.90
87.5-108.5
98.10
105.5-115.4
108.60
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