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信号通路
英文名称: Mouse Tumor Necrosis Factor α (TNF-α) ELISA Kit
别名: TNF-α
实验类型: 双抗夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.078ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体。
隐藏域元素占位
详细信息
简介
本试剂盒使用ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液等样本 中的TNF-α 含量。
实验原理
该ELISA试剂盒的原理基于夹心法酶联免疫吸附测定( ELISA) 。96 孔板预先包被 了针对小鼠TNF-α 的特异性单克隆抗体。将样本或标准品加入微孔中,经温育后, 洗涤去除未结合物,随后加入HRP标记的检测抗体工作液,再次温育并洗涤;最 后加入TMB底物显色。TMB在HRP的催化作用下转化为蓝色,并在酸的作用下最 终转变为黄色。显色强度与样本中的小鼠TNF-α 含量成正相关。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度( OD值),并计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的TNF-α, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.24
1.39
0.89
0.57
0.33
0.23
0.15
0.06
校正OD 值
2.18
1.33
0.83
0.51
0.17
0.17
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠细胞培养上清血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠TNF-α , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
细胞培养上清(n=8)
87-109%
96
血清(n=8)
86-107%
92
血浆(n=8)
84-105%
91
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠细胞培养上清血清血浆中加入高浓度小鼠TNF-α , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
细胞培养上清
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
86-95%
86-95%
87-98%
87-98%
87-102%
87-102%
1:04
范围
平均回收率
92-98%
92-98%
89-97%
89-97%
91-104%
91-104%
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